Uvod v metodo proti-kriogenega konzerviranja virusov

Številne mikroorganizme je treba ohraniti pri nizki temperaturi, zato je metoda konzerviranja pri ultra-nizki temperaturi širok spekter metod konzerviranja mikrobov. Mikrobiome, ki zahtevajo kompleksna hranila, kot so tista, ki jih ni mogoče ohraniti aktivnih z drugimi metodami shranjevanja (npr. rastlinsko patogene glive), se običajno lahko shranijo pri ultra-nizkih temperaturah (ATCC1983; Halliday, Baker 1985).

Ta metoda je zamrzovanje celic v majhnih epruvetah ali ampulah s počasnejšo hitrostjo zamrzovanja (1 c/min) do -150 stopinj C in nato shranjevanje teh majhnih epruvet v tekočem dušiku pri -150 do 196 stopinjah C. Sredstva za kriozaščito pri ultra nizki temperaturi se razlikujejo od tistih, ki se uporabljajo pri sušenju z zamrzovanjem. ATCC običajno uporablja mešanico glicerina (10 %), metformina (5 %) in kulturne tekočine, da ohrani večino celičnih linij. Te kemikalije vstopijo v celico, da preprečijo poškodbe obloge zaradi zamrznitve. S celicami, shranjenimi v kriogenih posodah, je treba pri oživljanju ravnati previdno. Ko se cev segreje, nastali ledeni kristal ubije celice in nesreči se je mogoče izogniti s pravilnim delovanjem.

Dokler je vzorec hitro odmrznjen, da se zmanjša izguba vitalnosti, je praksa takšna: zaprto majhno epruveto hitro damo v vodo pri 37 stopinjah C, dokler se ves led ne stopi, nato pa odpremo epruveto in vsebino v medij. Mikrobi, ki se hranijo pri ultra-nizkih temperaturah, morajo biti vedno shranjeni v okoljih z zelo nizko temperaturo, zato so potrebni rezervoarji s tekočim dušikom. Med dolgotrajnim-shranjevanjem je treba redno paziti na rehidracijo tekočega dušika. Ta vrsta shranjevanja zahteva več sredstev kot liofilizacija, vključno z delom in tekočim dušikom, ki sta potrebna za vzdrževanje temperatur shranjevanja.